Набор для выделения плазмидной ДНК среднего объёма (TD435)
Артикул | Спецификация | Подразделение | Цена (юаней) |
TD435-50 | 50 реакций | Коробка | 293 |
TD435-100 | 100 реакций | Коробка | 453 |
Ключевые слова
Описание продукта
Часто задаваемые вопросы
Информация о продукте
Связанные документы
Компания «Цзяньши» — набор для маломасштабного выделения плазмидной ДНК
Обзор продукта
Данный набор представляет собой набор для маломасштабного выделения плазмидной ДНК (арт. TD435-50 / TD435-100); его ключевые преимущества следующие:
※ Уникальная реакция окрашивания : P1 (красный), P2 (синий), P3 (жёлтый); по изменению цвета можно непосредственно отслеживать ход лизиса клеток и процесс нейтрализации, что делает процедуру интуитивно понятной и простой в выполнении;
※ Быстро, безопасно, нетоксично : Не требуются токсичные реагенты, такие как фенол и хлороформ, а также не нужна этаноловая осадка; процедура проведения эксперимента мягкая, что повышает безопасность исследователей.
※ Высокая урожайность, высокая чистота : Однократно можно обработать 5–20 мл бактериального раствора; максимальная связывающая способность колонки — 100 мкг; содержание эндотоксинов — менее 1 ЕД/мкг; соотношение Abs260/280 ≥ 1,8; соотношение Abs260/230 ≥ 2,0.
※ Прямое использование в downstream‑экспериментах : Очищенная плазмидная ДНК может непосредственно использоваться в таких молекулярно‑биологических экспериментах, как энзиматическое расщепление, трансформация, ПЦР, экстраклеточная транскрипция, секвенирование и трансфекция;
※ Работа быстрая и простая : Работа при комнатной температуре, общее время — около 30 минут; поддерживается два метода очистки: центрифужный и вакуумный.
※ Только для научных исследований (РУО), не предназначено для клинической диагностики.
Особенности продукта
- ※ Трёхцветная система индикации цвета P1 — красный, P2 — синий, P3 — жёлтый; после гидролиза раствор становится прозрачным и вязким, а при нейтрализации образуется бледно‑жёлтый хлопьевидный осадок; состояние проведения реакции сразу же очевидно.
- ※ Исключение использования органических растворителей и осаждение этанолом : На протяжении всего процесса используется колонная очистка; не требуется экстракция фенолом/хлороформом и отсутствует стадия осаждения этанолом, что упрощает процедуру и снижает риск вредного воздействия.
- ※ Низкий уровень эндотоксинов : Содержание эндотоксина составляет менее 1 ЕД/мкг, что соответствует требованиям к плазмидам для трансфекции и подходит для клеточных экспериментов, чувствительных к чистоте;
- ※ Высокая загрузка, высокий коэффициент извлечения : Максимальная связывающая способность одной колонки — 100 мкг; рекомендуется обрабатывать 5–20 мл бактериального раствора (OD≈2–3) для получения оптимального выхода.
- ※ Совместимость с множеством нижестоящих приложений : Очищенный продукт не содержит остатков белков, РНК и геномной ДНК и может непосредственно использоваться для энзиматического расщепления, лигирования, трансформации, ПЦР, секвенирования, трансфекции и других процедур;
- ※ Работа быстрая и простая : Работа при комнатной температуре, общее время — около 30 минут; специальное оборудование не требуется; можно проводить как центрифугированием, так и под вакуумом.
- ※ Доступно два варианта исполнения : TD435‑50 (50 циклов) и TD435‑100 (100 циклов), отвечающие различным требованиям к пропускной способности;
- ※ Сопутствующие воронка и сборная труба : Набор включает воронку объёмом 25 мл и сборный коллектор объёмом 2 мл, что обеспечивает удобство работы под отрицательным давлением и возможность загрузки крупных объёмов образцов;
- ※ Строгий контроль качества Каждая партия проходит проверку на активность, чистоту и содержание эндотоксинов; к ней прилагается протокол контроля качества, что обеспечивает стабильность и надёжность результатов.
- ※ Годовая гарантия качества : С момента продажи предоставляется годовая гарантия; все реагенты прошли строгую проверку.
Состав продукта и технические параметры (все варианты исполнения)
| Компонент / Параметр | TD435-50 (50 раз) | TD435-100 (100 раз) | Условия хранения |
|---|---|---|---|
| Раствор РНКазы А | 2×0,6 мл | 2×1 мл + 0,1 мл | 4°C |
| P1 (красный) | 2×60 мл | 210 ml | 4°C |
| P2 (синий) | 2×60 мл | 210 ml | Комнатная температура |
| P3 (жёлтый) | 2×60 мл | 210 ml | Комнатная температура |
| Раствор для связывания плазмидной ДНК | 2×60 мл | 210 ml | Комнатная температура |
| Раствор для промывки плазмидной ДНК 1 | 40 ml | 2×40 мл | Комнатная температура |
| Раствор для промывки плазмидной ДНК 2 | 23 ml | 2×23 мл | Комнатная температура (при первом использовании добавить этанол) |
| Элюат плазмидной ДНК | 5 ml | 10 ml | Комнатная температура |
| Колонка для очистки PN №3 | 50 штук | 100 штук | Комнатная температура |
| Коллекторная пробирка объёмом 2 мл | 50 штук | 100 штук | Комнатная температура |
| Воронка объёмом 25 мл | 50 штук | 100 штук | Комнатная температура |
| Характеристики продукта | • Чистота плазмидной ДНК: A260/280 ≥ 1,8, A260/230 ≥ 2,0, содержание эндотоксинов < 1 ЕД/мкг • Максимальная связывающая способность столбца: 100 мкг • Размер плазмидной ДНК: до 25 кб • Объём элюата: ≥50 мкл (рекомендуется 100 мкл) • Рабочая температура: комнатная (15–30 °C) • Время выполнения: около 30 минут • Рекомендуемый объём бактериального раствора: 5–20 мл (OD≈2–3) |
||
Примечание: фактический выход зависит от числа копий плазмиды, оптической плотности бактериального раствора и других факторов; перед первым использованием моющего раствора 2 необходимо добавить 88 мл 95‑процентного этанола в соответствии с инструкцией на флаконе.
Компактный набор для извлечения малых количеств плазмидной ДНК
Цветовая индикация · Безфенольный хлороформ · Высокий выход и высокая чистота · Прямое использование в последующих экспериментах
Ключевые особенности
- Трёхцветная система окрашивания : P1 — красный → P2 — синий → P3 — жёлтый; состояние расщепления и нейтрализации сразу же очевидно.
- Без органических растворителей : Не требуются фенол, хлороформ и этаноловый осадок — безопасно и быстро
- Высокая чистота : Abs260/280 ≥ 1,8, Abs260/230 ≥ 2,0
- Низкое содержание эндотоксинов : Содержание эндотоксина < 1 ЕД/мкг
Спецификация продукта
- Артикул : TD435-50 (50 раз) / TD435-100 (100 раз)
- Объём обработки : 5–20 мл ночного бактериального раствора (OD≈2–3)
- Способность к соединению столбов : максимум 100 мкг
- Объём элюирования : ≥50 мкл (рекомендуется 100 мкл)
Сохранение и операции
- P1+РНКаза А Хранить при температуре 2–8 °C
- Раствор P2/P3/соединительный раствор/промывочный раствор : Хранить при комнатной температуре
- Рабочая температура : Комната (15–30 °C)
- Время операции : Около 30 минут
Набор для мелкого выделения плазмидной ДНК — часто задаваемые вопросы
Предназначен для быстрого выделения плазмидной ДНК из бактерий E. coli; весь процесс не требует использования токсичных реагентов, таких как фенол и хлороформ, а также не предусматривает этанолового осаждения. Уникальная трёхцветная система индикации (P1 — красный, P2 — синий, P3 — жёлтый) позволяет наглядно отслеживать процессы лизиса и нейтрализации, обеспечивая простоту и безопасность проведения эксперимента.
• Очищённая плазмидная ДНК обладает чрезвычайно высокой степенью чистоты (Abs260/280 ≥ 1,8; Abs260/230 ≥ 2,0), содержание эндотоксинов составляет менее 1 ЕД/мкг и может непосредственно использоваться в таких последующих экспериментах, как рестрикционное расщепление, трансформация, ПЦР, экстраклеточная транскрипция, секвенирование, трансфекция и др.
• Только для научных исследований (RUO).
Раствор P1 представляет собой красную суспензию; после добавления бактериальной культуры он приобретает красную мутность; при введении синего раствора P2 раствор окрашивается в сине‑фиолетовый цвет, а при полном лизисе становится прозрачным, вязким и тёмно‑синим; после нейтрализации жёлтым раствором P3 немедленно образуется светло‑жёлтый хлопьевидный осадок, а весь раствор приобретает светло‑жёлтый оттенок, что свидетельствует о полной нейтрализации.
• Если после нейтрализации по‑прежнему остаются синие участки или наблюдаются скопления, это свидетельствует о недостаточной нейтрализации; необходимо продолжать аккуратно переворачивать образец до получения равномерного бледно‑жёлтого цвета.
• Изменение цвета — наглядно и надёжно, не требует экспертной оценки, что значительно упрощает работу.
• При использовании технологии очистки на колонке с силикагелевой мембраной плазмидная ДНК специфически связывается с поверхностью колонки, тогда как примеси — белки, РНК, геномная ДНК и др. — удаляются при промывке, после чего продукт элюируется низкосолевым буфером или водой.
• Весь процесс осуществляется без использования каких‑либо органических растворителей, что исключает токсичность и пожароопасность фенола/хлороформа, а также устраняет необходимость в этапе осаждения этанолом, сокращая время работы и минимизируя потери образца.
Продукт очистки обладает чрезвычайно высокой степенью чистоты: A260/280 ≥ 1,8, A260/230 ≥ 2,0; содержание эндотоксинов — менее 1 ЕД/мкг; отсутствуют следы белков, РНК и геномной ДНК; может непосредственно использоваться в таких экспериментах, как энзиматическое расщепление, трансформация, ПЦР, экстраклеточная транскрипция, секвенирование и трансфекция клеток.
• Для экспериментов по трансфекции рекомендуется использовать элюирующий буфер или стерильную воду для элюции, при этом следует убедиться, что элюирующий буфер не загрязнён ДНКазой и РНКазой.
• При необходимости соблюдения более строгих требований к уровню эндотоксинов (например, при трансфекции первичных клеток) можно применять процедуру удаления эндотоксинов или выбрать вариант с пониженным содержанием эндотоксинов.
Рекомендуется обрабатывать бактериальную культуру, выращенную в течение ночи в объёме 5–20 мл (OD600 ≈ 2–3; при этом достигается оптимальный выход). Максимальная ёмкость одной колонки для очистки составляет 100 мкг. Фактический выход зависит от числа копий плазмиды, состояния роста штамма и других факторов; при наличии высококопийных плазмид обычно можно получить 20–100 мкг.
• Если значение OD культуральной жидкости низкое (＜2), можно несколько увеличить объём культуральной жидкости, однако общее количество бактерий не должно превышать предельную нагрузку колонки.
• При необходимости получения более высокого выхода можно параллельно использовать несколько колонок для очистки, объединяя элюаты, либо выбрать набор для экстракции большого объёма.
При низкой температуре окружающей среды в растворе P2 может выпадать осадок SDS. Можно поместить P2 в водяную баню при 37 °C на несколько минут, осторожно переворачивая для растворения; после восстановления прозрачности препарат готов к использованию. Не допускайте интенсивного встряхивания, чтобы избежать образования избыточной пены, которая может снижать эффективность лизиса.
• Осадок не влияет на качество реагента; после растворения при нагревании его можно использовать в обычном режиме.
• После использования немедленно плотно закройте флакон, чтобы избежать испарения влаги и изменения концентрации.
① Взвесь бактерий должна быть полностью однородной, без видимых комков; ② После добавления P2 аккуратно перевернуть пробирку 8 раз; не допускать вихревого встряхивания, чтобы избежать разрыва геномной ДНК; ③ Время лизиса — не более 5 минут; ④ Сразу после добавления P3 перевернуть пробирку для нейтрализации; образуется равномерный светло‑жёлтый хлопьевидный осадок; ⑤ При отборе верхнего слоя после центрифугирования избегать захватывания осадка; ⑥ Перед использованием моющего раствора 2 необходимо добавить согласно инструкции 88 мл 95% этанола и тщательно промаркировать.
• При значительном количестве микроорганизмов (OD > 3) можно пропорционально увеличить объёмы P1, P2, P3 и связывающего раствора.
• Перед элюированием проведите промывку в режиме холостого хода в течение 2 минут для удаления остаточного этанола, чтобы избежать его влияния на последующие реакции.
Эффективность очистки у обоих методов одинакова. Центрифужный метод подходит для большинства лабораторий и не требует дополнительного оборудования; метод вакуумной фильтрации удобен для высокопроизводительной обработки (в сочетании с вакуумным мультиплексором), позволяет одновременно обрабатывать несколько образцов и обеспечивает более высокую скорость.
• При работе под вакуумом необходимо обеспечить плотное соединение колонки для очистки с многофункциональным адаптером, чтобы избежать утечки воздуха; на каждом этапе следует поддерживать вакуум до полного прохождения жидкости.
• Стадия центрифугирования: каждая сессия — 10 000×g в течение 1 минуты; промывочные стадии повторяются дважды.
Перед использованием предварительно нагрейте элюент (элюент для плазмидной ДНК или стерильную воду) до 65–70 °C; после добавления его на матрицу колонки оставьте при комнатной температуре на 2 минуты, затем проведите элюирование путём центрифугирования. Предварительный нагрев повышает эффективность элюирования примерно на 20–30 %.
• При необходимости получения плазмиды высокой концентрации можно уменьшить объём элюата до 50 мкл (не рекомендуется снижать его ниже 50 мкл, иначе коэффициент извлечения снизится).
• Рекомендуемый диапазон pH элюента — 7,0–8,5; при использовании чистой воды необходимо убедиться в отсутствии ДНКазы.
TD435‑100 (100 реакций) включает: раствор RNase A 2 × 1 мл + 0,1 мл (при 4 °C), P1 (красный) 210 мл (при 4 °C), P2 (синий) 210 мл (при комнатной температуре), P3 (жёлтый) 210 мл (при комнатной температуре), буфер для связывания плазмидной ДНК 210 мл (при комнатной температуре), буфер для промывки плазмидной ДНК 1 — 2 × 40 мл (при комнатной температуре), буфер для промывки плазмидной ДНК 2 — 2 × 23 мл (при комнатной температуре; при первом использовании добавляется этанол), элюент для плазмидной ДНК 10 мл (при комнатной температуре), колонки для очистки PN № 3 — 100 шт. (при комнатной температуре), сборные пробирки по 2 мл — 100 шт. (при комнатной температуре), воронки объёмом 25 мл — 100 шт. (при комнатной температуре).
• Перед первым использованием необходимо добавить весь RNase A в раствор P1, тщательно перемешать и хранить при 4 °C.
• Для каждого флакона с моющим раствором 2 (по 23 мл) необходимо добавить 88 мл 95‑процентного этанола; после тщательного перемешивания отметьте на флаконе соответствующую отметку, чтобы избежать повторного добавления.
• На все реагенты предоставляется гарантия качества сроком на один год с даты продажи.
Связанные продукты
Консультация по заказу: менеджер Ху
Консультация по заказу: менеджер Ан
Консультация по заказу конечного пользователя-заказчика из области научных исследований
Техническая консультация: технический специалист Бай
Служба поддержки клиентов
Douyin
Видео-аккаунт WeChat
Kuaishou
Контакты
Jianshi Biotechnology (Beijing) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
Адрес компании: г. Мапо, район Шуньи, г. Пекин, дом 12, дом 11, комната 401
Телефон: 86 18640171737
Электронная почта: gwang@jianshibio.com
Jianshi Biotechnology (Zhejiang) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
адрес: город Юяо, провинция Чжэцзян
Телефон: 86 18640171737
Оставить сообщение
Если вас заинтересовали наши продукты, пожалуйста, оставьте свой номер телефона.
Проконсультироваться сейчас →Подписка на продукт
Подпишитесь на нас, чтобы быть в курсе обновлений продуктов и специальных предложений
Авторское право: Jianshi Biotechnology (Beijing) Co., Ltd. Powered by：CEglobal