Набор для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах (TD436)
Ключевые слова
Описание продукта
Часто задаваемые вопросы
Информация о продукте
Связанные документы
Набор для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах (арт. TD436‑50 / TD436‑150)
Обзор продукта
Набор для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах основан на оригинальной системе лизиса и нейтрализации с цветным индикатором; не требует использования токсичных реагентов — фенола и хлороформа, — а также этаноловой осадки. Вся процедура проводится при комнатной температуре и позволяет получить плазмидную ДНК всего за 30 минут. Набор рассчитан на обработку 5–20 мл бактериальной культуры; за один цикл можно выделить до ≈100 мкг плазмидной ДНК, он совместим с плазмидами размером до 25 кб. Полученная плазмида характеризуется соотношением A260/A280 ≥ 1,8, A260/A230 ≥ 2,0 и уровнем эндотоксинов < 1 ЕД/мкг, что позволяет непосредственно использовать её в таких молекулярных экспериментах, как рестрикционный анализ, трансформация, ПЦР, экстравитальная транскрипция, секвенирование и трансфекция клеток. Поддерживается два режима перегонки через колонку: с использованием центрифужных колонок или вакуумного многоканального устройства. Гарантийный срок — 1 год. Продукт предназначен исключительно для научных исследований (RUO) и не предназначен для клинической диагностики.
Особенности продукта
- ※ Система цветного разложения и нейтрализации : P1 — красная, P2 — синяя, P3N — жёлтая цветовая реакция; визуальная оценка состояния завершения лизиса и нейтрализации позволяет снизить вероятность ошибок при проведении процедуры.
- ※ Безопасно и просто, не требует токсичных реагентов Не используются фенол и хлороформ, не требуется осаждение этанолом, работа проводится при комнатной температуре; вся процедура занимает около 30 минут.
- ※ Высокий выход плазмиды, подходит для большого объёма бактериальной культуры Обрабатывает 5–20 мл бактериального раствора; при одном цикле можно получить до ≈100 мкг плазмиды; поддерживает плазмиды размером до 25 кб; объём элюата ≥100 мкл.
- ※ Высокая чистота, низкое содержание эндотоксинов : Abs260/280≥1,8, Abs260/230≥2,0, эндотоксин < 1 ЕД/мкг, что соответствует высоким требованиям экспериментов, включая трансфекцию;
- ※ Доступен двойной режим работы Поддерживает стандартную центрифугу с колонкой, а также совместим с вакуумным мультиплексором для вакуумной фильтрации; подходит для высокопроизводительной обработки образцов.
- ※ Совместимость с различными видами последующих экспериментов Выделенный плазмидный ДНК можно непосредственно использовать для трансформации, энзиматического расщепления, ПЦР, секвенирования, ин витро-транскрипции и трансфекции клеток;
- ※ Два варианта упаковки Наборы для 50 и 150 реакций, отвечающие требованиям маломасштабных экспериментов и массового получения плазмид.
Технические характеристики набора для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах (все форматы)
| Классификация по спецификации | Артикул | Название продукта | Упаковка: спецификация |
|---|---|---|---|
| Набор для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах | ТД436‑50 | Набор для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах | Набор для 50 реакций |
| ТД436‑150 | Набор для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах | Набор для 150 реакций |
TD436 Набор для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах
С индикатором цветного расщепления и нейтрализации, поддерживает два режима работы — центрифугирование и вакуумное отсасывание; полученный продукт применяется для трансфекции, секвенирования, энзиматического расщепления и экстравакулярной транскрипции.
Артикул и спецификация товара
- Артикул TD436‑50 : 50 реакций
- Артикул TD436‑150 : 150 реакций
- Колонка для очистки : Очищающая колонка PW №3
- Общая продолжительность операции : около 30 минут
Основные показатели производительности
- Выход плазмиды : максимум около 100 мкг
- Предел плазмиды : Поддержка плазмид размером до 25 кб
- Эндотоксин : <1 ЕД/мкг
- Объём элюирования : ≥100 мкл
Ключевые характеристики
- Цветовая индикация : P1 красный — P2 синий — P3N жёлтый, оценка степени нейтрализации невооружённым глазом
- Двойной режим : Поддержка центрифугирования и перекачивания через колонку под вакуумным давлением
- Совместимость с хостом : Операция по различению штаммов endA+ / endA‑
- Гарантийный срок : 12 месяцев после продажи
Часто задаваемые вопросы по высокочастотному набору реагентов для ультрабыстрого извлечения плазмидной ДНК в малых объёмах TD436
P1 окрашен в красный цвет, P2 — в синий, P3‑N — в жёлтый; после лизиса смесь красного и синего оттенков даёт фиолетово‑красный цвет. При добавлении P3‑N и тщательном перемешивании фиолетово‑красный цвет полностью исчезает, вся смесь приобретает однородный жёлтый оттенок, появляется рыхлый жёлтый хлопьевидный осадок — это свидетельствует о полной нейтрализации. Если же в растворе сохраняется фиолетово‑красный оттенок, это указывает на недостаточную нейтрализацию, что может негативно повлиять на чистоту и выход плазмиды.
Можно использовать. Поместите P2 в водяную баню при 37 °C на несколько минут; после полного растворения осадка и восстановления прозрачности охладите до комнатной температуры — затем можно приступать к эксперименту. Сильное встряхивание приводит к образованию большого количества пены, что ухудшает эффективность лизиса.
1. Добавьте весь раствор RNase A в раствор P1 и тщательно перемешайте; конечная концентрация — 100 мкг/мл. После приготовления храните при температуре 2–8 °C; при отсутствии RNase A останется значительное количество РНК.
2. Перед использованием к раствору для промывки плазмидной ДНК 2 добавьте 88 мл этанола концентрацией 95–100%, надежно маркируйте емкость, чтобы избежать повторного добавления этанола.
Рекомендуемая оптическая плотность культуры при длине волны 600 нм (OD₆₀₀) составляет менее 3; именно при этом значении достигается максимальный выход плазмиды. Слишком высокая концентрация клеток приводит к неполному лизису и может вызвать засорение колонки для очистки; если объём бактериального раствора больше, необходимо пропорционально увеличить расход реагентов P1/P2/P3‑N.
Штаммы endA+ (Stbl3, BL21, HB101, TG1): необходимо выполнить стадию промывки с использованием раствора для удаления плазмид, чтобы устранить загрязнение нуклеазами.
Штаммы endA‑ (DH5α, TOP10): промывочный раствор 1 является необязательным этапом и может быть опущен.
После добавления P2-лиза Время выдержки при комнатной температуре строго не более 3 минут; запрещается интенсивное вихревое перемешивание. Можно лишь мягко перемешивать путём переворачивания. Сильное встряхивание или чрезмерно длительная лизис‑фаза могут привести к фрагментации геномной ДНК и загрязнению образца; также при слишком продолжительном лизисе может повредиться плазмидная ДНК.
При переносе супернатанта после центрифугирования в колонку для очистки столкновение наконечника пипетки с жёлтым хлопьевидным осадком на дне или с пенным слоем, а также их всасывание могут привести к засорению колонки. При отборе супернатанта по возможности избегайте контакта с осадком на дне пробирки и переносите только чистый жидкий супернатант.
Перегрузка клеточной массы и неполное нейтрализование при лизисе также повышают вероятность засорения колонки; следует контролировать оптическую плотность клеточного раствора и обеспечивать полную стабилизацию окрашивания.
Объём элюента составляет не менее 100 мкл; элюент можно предварительно нагреть в водяной бане при температуре 65–70 °C, что эффективно повышает эффективность элюирования; капельно добавить в центр силикагелевой мембраны колонки для очистки, выдержать при комнатной температуре в течение 2 минут, затем провести элюирование путём центрифугирования при ≥10000×g в течение 1 минуты.
Слишком малый объём элюата снижает эффективность выделения плазмид; не рекомендуется уменьшать его до менее 100 мкл.
Продукт можно непосредственно использовать в таких экспериментах, как трансфекция клеток, энзиматическое расщепление ДНК, трансформация, ПЦР, ин витро‑транскрипция и секвенирование.
Нормативные показатели: A260/A280 ≥ 1,8, A260/A230 ≥ 2,0, эндотоксин < 1 ЕД/мкг; допустимый максимальный размер плазмиды — 25 кб.
- ✅ Режим вакуумной откачки: подходит для обработки больших партий образцов, исключает необходимость многократного центрифугирования и удаления отходов, ускоряет проведение эксперимента; требует использования вакуумного мультиразъёма и вакуумного насоса, а также установки буферной ёмкости с защитой от обратного тока жидкости.
- ✅ Центрифугирование: не требует дополнительного вакуумного оборудования — можно использовать обычную настольную центрифугу; при обработке больших объёмов образцов необходимо многократное центрифугирование с удалением отходов, что делает процедуру трудоёмкой и времязатратной.
Связанные продукты
Консультация по заказу: менеджер Ху
Консультация по заказу: менеджер Ан
Консультация по заказу конечного пользователя-заказчика из области научных исследований
Техническая консультация: технический специалист Бай
Служба поддержки клиентов
Douyin
Видео-аккаунт WeChat
Kuaishou
Контакты
Jianshi Biotechnology (Beijing) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
Адрес компании: г. Мапо, район Шуньи, г. Пекин, дом 12, дом 11, комната 401
Телефон: 86 18640171737
Электронная почта: gwang@jianshibio.com
Jianshi Biotechnology (Zhejiang) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
адрес: город Юяо, провинция Чжэцзян
Телефон: 86 18640171737
Оставить сообщение
Если вас заинтересовали наши продукты, пожалуйста, оставьте свой номер телефона.
Проконсультироваться сейчас →Подписка на продукт
Подпишитесь на нас, чтобы быть в курсе обновлений продуктов и специальных предложений
Авторское право: Jianshi Biotechnology (Beijing) Co., Ltd. Powered by：CEglobal