Набор для маломасштабного выделения плазмидной ДНК (TD429)
Артикул | Название продукта | Упаковка, спецификация | Цена |
TD429-100 | Комплект для маломасштабного выделения плазмидной ДНК | 100 раз/коробка | 100 |
TD429-200 | 200 раз/коробка | 180 |
Ключевые слова
Категория
Описание продукта
Часто задаваемые вопросы
Информация о продукте
Связанные документы
Компания «Цзяньши» — набор реагентов для маломасштабного выделения плазмидной ДНК
Обзор продукта
Данный набор представляет собой классический набор для маломасштабного выделения плазмидной ДНК (артикулы TD429‑100/TD429‑200); его ключевые преимущества следующие:
※ Уникальная цветная реакция : P1 (красный), P2 (синий), P3 (жёлтый); по изменению цвета можно непосредственно оценить степень лизиса клеток и уровень нейтрализации; процедура проста и наглядна в интерпретации.
※ Быстро, безопасно, нетоксично : Не требуются токсичные реагенты, такие как фенол и хлороформ, а также осаждение этанолом; процедура проведения эксперимента мягкая, что повышает безопасность персонала.
※ Высокая урожайность, высокая чистота : Классическая версия позволяет обрабатывать до 4 мл бактериального раствора, обеспечивая единовременный выход до 100 мкг; уровень эндотоксинов — не более 1 ЕД/мкг; соотношение Abs260/280 — ≥1,8; соотношение Abs260/230 — ≥2,0.
※ Прямое использование в downstream‑экспериментах : Чистая плазмидная ДНК может непосредственно использоваться в таких молекулярно‑биологических экспериментах, как энзиматическое расщепление, трансформация, ПЦР, экстраклеточная транскрипция, секвенирование и трансфекция;
※ Только для научных исследований (РУО), не предназначено для клинической диагностики.
Особенности продукта
- ※ Трёхцветная система индикации цвета : P1 — красный, P2 — синий, P3 — жёлтый; после расщепления раствор становится прозрачным и вязким; при нейтрализации образуется бледно‑жёлтый хлопьевидный осадок; состояние проведения операции сразу же очевидно.
- ※ Исключение органических растворителей и осаждение этанолом : На протяжении всего процесса используется колонная очистка; не требуется экстракция фенолом/хлороформом и отсутствует этап осаждения этанолом, что упрощает процедуру и снижает риск вредного воздействия.
- ※ Сверхнизкий уровень эндотоксинов : В классической версии уровень эндотоксина не превышает 1 ЕД/мкг, что соответствует требованиям к плазмидам для трансфекции и особенно подходит для клеточных экспериментов, чувствительных к чистоте.
- ※ Высокая загрузка, высокий коэффициент извлечения : Максимальная связывающая способность одной колонки — 100 мкг; в классической версии рекомендуется обрабатывать не более 4 мл бактериальной культуры (OD≈2–3), при этом выход может достигать 100 мкг.
- ※ Совместимость с множеством нижестоящих приложений : Очищенный продукт не содержит остатков белков, РНК и геномной ДНК и может непосредственно использоваться для энзиматического расщепления, лигирования, трансформации, ПЦР, секвенирования, трансфекции и других процедур;
- ※ Операция быстрая и простая : Работа при комнатной температуре, общее время — около 30 минут; специальное оборудование не требуется; можно проводить как центрифугированием, так и под вакуумом.
- ※ Доступно два варианта исполнения : TD429‑100 (100 циклов) и TD429‑200 (200 циклов), отвечают различным требованиям по пропускной способности;
- ※ Полный набор сопутствующих реагентов Комплект включает RNase A, буферы P1/P2/P3, связывающий раствор, моющие растворы 1 и 2, элюент, колонку для очистки и сборные пробирки; готов к немедленному использованию.
- ※ Строгий контроль качества Каждая партия проходит контроль на активность, чистоту и содержание эндотоксинов; прилагается протокол проверки качества, что обеспечивает стабильность и надёжность результатов.
- ※ Годовая гарантия качества : С момента продажи предоставляется годовая гарантия; все реагенты прошли строгую проверку.
Состав продукта и технические параметры (классическая версия)
| Компонент / Параметр | TD429-100 (100 раз) | TD429-200 (200 раз) | Условия хранения |
|---|---|---|---|
| Объём обработки в классической версии | ≤20 мл бактериального раствора | ≤20 мл бактериального раствора | — |
| Объём производства классической версии | 200 мкг | 200 мкг | — |
| Уровень эндотоксина | ≤0,1 ЕД/мкг | ≤0,1 ЕД/мкг | — |
| Раствор РНКазы А | 0,3 мл | 0,6 мл | 4°C |
| P1 (красный) | 30 ml | 60 ml | 4°C |
| P2 (синий) | 30 ml | 60 ml | Комнатная температура |
| P3 (жёлтый) | 30 ml | 60 ml | Комнатная температура |
| Раствор для связывания плазмидной ДНК | 30 ml | 60 ml | Комнатная температура |
| Раствор для промывки плазмидной ДНК 1 | 2 × 40 мл | 4 × 40 мл | Комнатная температура |
| Раствор для промывки плазмидной ДНК 2 | 2 × 23 мл (Перед использованием добавить 88 мл 95% этанола) |
4 × 23 мл (Перед использованием добавить 88 мл 95% этанола) |
Комнатная температура |
| Элюат плазмидной ДНК | 10 ml | 20 ml | Комнатная температура |
| Колонка для очистки PN №3 | 100 штук | 200 штук | Комнатная температура |
| Коллекторная трубка объёмом 2 мл | 100 штук | 200 штук | Комнатная температура |
| Рабочая температура | Комнатная температура (15–30 °C) | — | |
| Время операции | Около 30 минут | — | |
| Размер плазмидной ДНК | Максимум 25 кб | — | |
| Объём элюирования | ≥50 мкл (рекомендуется 100 мкл) | — | |
Примечание: под «классическим вариантом» понимается оптимизированная процедура, рассчитанная на обработку объёма бактериального раствора до 20 мл, с выходом 200 мкг и уровнем эндотоксина не более 0,1 ЕД/мкг; фактический выход зависит от числа копий плазмиды, значения OD бактериального раствора и других факторов.
Компания «Цзяньши» — набор реагентов для маломасштабного выделения плазмидной ДНК
Цветовая индикация · Безфенольный хлороформ · Высокий выход и высокая чистота · Прямое использование в последующих экспериментах
Ключевые особенности
- Трёхцветная система окрашивания : P1 — красный → P2 — синий → P3 — жёлтый; состояние расщепления и нейтрализации сразу же очевидно.
- Без органических растворителей : Не требуются фенол, хлороформ и этаноловые осадки — безопасно и быстро
- Высокая чистота : Abs260/280 ≥ 1,8, Abs260/230 ≥ 2,0
- Низкое содержание эндотоксинов : Содержание эндотоксина < 1 ЕД/мкг
Спецификация продукта
- Артикул : TD429-100 (100 циклов) / TD429-200 (200 циклов)
- Объём обработки : 1–4 мл ночного бактериального раствора (OD≈2–3)
- Способность к соединению столбов : максимум 100 мкг
- Объём элюирования : ≥50 мкл (рекомендуется 100 мкл)
Сохранение и операции
- P1+РНКаза А Хранить при температуре 2–8 °C
- Раствор P2/P3/соединительный раствор/промывочный раствор : Хранить при комнатной температуре
- Рабочая температура : Комната (15–30 °C)
- Время операции : Около 30 минут
Набор для мелкомасштабного выделения плазмидной ДНК — часто задаваемые вопросы
Предназначен для быстрого выделения плазмидной ДНК из бактерий E. coli; весь процесс не требует использования токсичных реагентов, таких как фенол и хлороформ, а также осаждения этанолом. Уникальная трёхцветная система индикации (P1 — красный, P2 — синий, P3 — жёлтый) позволяет наглядно отслеживать процессы лизиса и нейтрализации, обеспечивая простоту и безопасность проведения эксперимента.
• Очищённая плазмидная ДНК обладает чрезвычайно высокой степенью чистоты (A260/280 ≥ 1,8; A260/230 ≥ 2,0), а уровень эндотоксинов составляет менее 1 ЕД/мкг; её можно непосредственно использовать в таких последующих экспериментах, как рестрикционное расщепление, трансформация, ПЦР, экстракорпоральная транскрипция, секвенирование и трансфекция.
• Только для научных исследований (RUO).
Раствор P1 представляет собой красную суспензию; после добавления бактериальной культуры он приобретает красную мутность; при введении синего раствора P2 раствор окрашивается в сине‑фиолетовый цвет, а при полном лизисе становится прозрачным, вязким и тёмно‑синим; после нейтрализации жёлтым раствором P3 немедленно образуется светло‑жёлтый хлопьевидный осадок, а весь раствор приобретает светло‑жёлтый оттенок, что свидетельствует о полной нейтрализации.
• Если после нейтрализации по‑прежнему остаются синие участки или наблюдаются скопления, это свидетельствует о недостаточной нейтрализации; необходимо продолжать аккуратно перемешивать до получения равномерного бледно‑жёлтого цвета.
• Изменение цвета — наглядно и надёжно, не требует экспертной оценки, что значительно упрощает эксплуатацию.
• При использовании технологии очистки на колонке с силикагелевой мембраной плазмидная ДНК специфически связывается с поверхностью колонки, тогда как примеси — белки, РНК, геномная ДНК и др. — удаляются при промывке, а в конечном итоге элюируется низкосолевым буфером или водой.
• Весь процесс осуществляется без использования каких‑либо органических растворителей, что исключает токсичность и пожароопасность фенола/хлороформа, а также устраняет необходимость в этапе осаждения этанолом, сокращая время работы и минимизируя потери образца.
Продукт очистки обладает чрезвычайно высокой степенью чистоты: A260/280 ≥ 1,8, A260/230 ≥ 2,0; содержание эндотоксинов < 1 ЕД/мкг; отсутствуют следы белков, РНК и геномной ДНК; может непосредственно использоваться в таких экспериментах, как энзиматическое расщепление, трансформация, ПЦР, экстравитальный транскрипционный анализ, секвенирование, а также трансфекция клеток.
• Для экспериментов по трансфекции рекомендуется использовать элюирующий буфер или стерильную воду для элюирования, при этом следует убедиться, что элюирующий буфер не загрязнён ДНКазой и РНКазой.
• При необходимости соблюдения более строгих требований к уровню эндотоксинов (например, при трансфекции первичных клеток) можно применять процедуру удаления эндотоксинов или выбрать вариант с пониженным содержанием эндотоксинов.
Рекомендуется обрабатывать 1–4 мл бактериальной культуры, выращенной в течение ночи (OD600 ≈ 2–3). Максимальная ёмкость одной колонки для очистки составляет 100 мкг. Фактический выход зависит от числа копий плазмиды, состояния роста штамма и других факторов; при использовании плазмид с высоким числом копий обычно можно получить 20–100 мкг.
• Если значение OD культуры низкое (＜2), можно несколько увеличить объём культуральной жидкости, однако общее количество бактерий не должно превышать предельной нагрузки колонки.
• При необходимости получения более высокого выхода можно параллельно использовать несколько колонок для очистки, объединяя элюаты, либо выбрать набор для экстракции большого объёма.
При низкой температуре окружающей среды в растворе P2 может выпадать осадок SDS. Можно поместить P2 в водяную баню при 37 °C на несколько минут, осторожно переворачивая для растворения; после восстановления прозрачности препарат готов к использованию. Не допускайте интенсивного встряхивания, чтобы избежать образования избыточной пены, которая может снижать эффективность лизиса.
• Осадок не влияет на качество реагента; после растворения при нагревании его можно использовать в обычном режиме.
• После использования немедленно плотно закройте флакон, чтобы избежать испарения влаги и изменения концентрации.
① Взвесь бактерий должна быть полностью однородной, без видимых комков; ② После добавления P2 аккуратно перевернуть 8 раз, не подвергать вихревому перемешиванию, чтобы избежать разрыва геномной ДНК; ③ Время лизиса — не более 5 минут; ④ Сразу после добавления P3 перевернуть для нейтрализации, при этом образуется равномерный бледно‑жёлтый хлопьевидный осадок; ⑤ При отборе верхнего слоя после центрифугирования следует избегать захвата осадка; ⑥ Перед использованием раствора для промывки 2 необходимо добавить согласно инструкции 88 мл 95% этанола и надлежащим образом пометить.
• При значительном количестве микроорганизмов (OD > 3) можно пропорционально увеличить объёмы P1, P2, P3 и связывающего раствора.
• Перед элюированием проведите промывку в режиме холостого хода в течение 2 минут для удаления остаточного этанола, чтобы избежать его влияния на последующие реакции.
Эффективность очистки у обоих методов одинакова. Центрифужный метод подходит для большинства лабораторий и не требует дополнительного оборудования; метод вакуумной фильтрации удобен для высокопроизводительной обработки (в сочетании с вакуумным мультиплексором), позволяет одновременно обрабатывать несколько образцов и обеспечивает более высокую скорость.
• При работе под вакуумом необходимо обеспечить плотное соединение колонки для очистки с многофункциональным адаптером, чтобы избежать утечки воздуха; на каждом этапе следует поддерживать вакуум до полного прохождения жидкости.
• Стадия центрифугирования: каждая сессия — 10 000×g в течение 1 минуты; промывочные стадии повторяются дважды.
Перед использованием предварительно нагрейте элюент (элюент для плазмидной ДНК или стерильную воду) до 65–70 °C; после добавления на матрицу колонки для очистки выдержите при комнатной температуре в течение 2 минут, затем проведите элюирование путём центрифугирования. Предварительный нагрев повышает эффективность элюирования примерно на 20–30 %.
• При необходимости получения плазмиды высокой концентрации можно уменьшить объём элюата до 50 мкл (не рекомендуется снижать его ниже 50 мкл, иначе коэффициент извлечения снизится).
• Рекомендуемый диапазон pH элюента — 7,0–8,5; при использовании чистой воды необходимо убедиться в отсутствии ДНКазы.
TD429‑100 (на 100 реакций) включает: раствор RNase A — 0,3 мл (при 4 °C), P1 (красный) — 30 мл (при 4 °C), P2 (синий) — 30 мл (при комнатной температуре), P3 (жёлтый) — 30 мл (при комнатной температуре), буфер для связывания плазмидной ДНК — 30 мл (при комнатной температуре), моющий буфер для плазмидной ДНК 1 — 2 × 40 мл (при комнатной температуре), моющий буфер для плазмидной ДНК 2 — 2 × 23 мл (при комнатной температуре; при первом использовании добавить этанол), элюент для плазмидной ДНК — 10 мл (при комнатной температуре), колонки для очистки PN № 3 — 100 шт. (при комнатной температуре), сборные пробирки объёмом 2 мл — 100 шт. (при комнатной температуре).
• Перед первым использованием необходимо добавить весь RNase A в раствор P1, тщательно перемешать и хранить при 4 °C.
• Для каждого флакона с моющим раствором 2 (по 23 мл) необходимо добавить 88 мл 95‑процентного этанола; после тщательного перемешивания отметьте на флаконе соответствующую отметку, чтобы избежать повторного добавления.
• На все реагенты предоставляется гарантия качества сроком на один год с даты продажи.
Связанные продукты
Консультация по заказу: менеджер Ху
Консультация по заказу: менеджер Ан
Консультация по заказу конечного пользователя-заказчика из области научных исследований
Техническая консультация: технический специалист Бай
Служба поддержки клиентов
Douyin
Видео-аккаунт WeChat
Kuaishou
Контакты
Jianshi Biotechnology (Beijing) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
Адрес компании: г. Мапо, район Шуньи, г. Пекин, дом 12, дом 11, комната 401
Телефон: 86 18640171737
Электронная почта: gwang@jianshibio.com
Jianshi Biotechnology (Zhejiang) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
адрес: город Юяо, провинция Чжэцзян
Телефон: 86 18640171737
Оставить сообщение
Если вас заинтересовали наши продукты, пожалуйста, оставьте свой номер телефона.
Проконсультироваться сейчас →Подписка на продукт
Подпишитесь на нас, чтобы быть в курсе обновлений продуктов и специальных предложений
Авторское право: Jianshi Biotechnology (Beijing) Co., Ltd. Powered by：CEglobal