Комплект для быстрого извлечения плазмидной ДНК в среднем объёме (TD435-CQ)
Артикул | Название продукта | Упаковка, спецификация | Цена |
TD435-CQ-50 | Комплект для быстрого извлечения малых количеств плазмидной ДНК (метод с изопропиловым спиртом) | 50 раз/коробка | 260 |
TD435-CQ-100 | 100 раз/коробка | 500 |
Ключевые слова
Описание продукта
Часто задаваемые вопросы
Информация о продукте
Связанные документы
Компания «Цзяньши» — набор реагентов для быстрого извлечения плазмидной ДНК в среднем объёме
Обзор продукта
Настоящий набор представляет собой набор для быстрого извлечения плазмидной ДНК в среднем объёме (артикул TD435, серия CQ); его ключевые преимущества следующие:
※ Уникальная цветная реакция : P1 (красный), P2, P4 — по изменению цвета можно непосредственно отслеживать ход лизиса клеток и процесс нейтрализации; процедура оценки проста и наглядна.
※ Быстро, безопасно, нетоксично : Не требуются токсичные реагенты, такие как фенол и хлороформ, а также не нужна этаноловая осадка; процедура проведения эксперимента мягкая, что повышает безопасность персонала.
※ Высокая урожайность, высокая чистота : Каждый раз можно выделить около 100 мкг плазмидной ДНК; содержание эндотоксинов крайне низко (≤0,5 ЕД/мкг); соотношение Abs260/280 ≥ 1,8; соотношение Abs260/230 ≥ 2,0.
※ Прямое использование в нижестоящих экспериментах : Очищенная плазмидная ДНК может непосредственно использоваться в таких чувствительных молекулярно‑биологических экспериментах, как энзиматическое расщепление, трансформация, ПЦР, экстраклеточная транскрипция, секвенирование, трансфекция и ин‑витро‑трансфекция клеток;
※ Операция быстрая и простая : Весь процесс занимает всего 16 минут, проводится при комнатной температуре и поддерживает два метода очистки — центрифугирование и вакуумное осаждение;
※ Только для научных исследований (РУО), не предназначено для клинической диагностики.
Особенности продукта
- ※ Трёхцветная система индикации цвета : P1 — красный, P2 и P4 после гидролиза приобретают чистый, прозрачный бледно‑розовый цвет; после нейтрализации окраска переходит в жёлтую, с образованием обильного белого хлопьевидного осадка; состояние проведения реакции сразу же становится очевидным.
- ※ Исключение органических растворителей и осаждение этанолом : На протяжении всего процесса используется колоночная очистка; не требуется экстракция фенолом/хлороформом и этап осаждения этанолом, что упрощает процедуру и снижает риск вредного воздействия.
- ※ Сверхнизкий уровень эндотоксинов : Содержание эндотоксинов ≤ 0,5 ЕД/мкг, что соответствует требованиям к плазмидам для трансфекции и особенно подходит для клеточных экспериментов, чувствительных к степени чистоты;
- ※ Высокая загрузка, высокий коэффициент извлечения : За один цикл можно обработать 5–15 мл бактериальной культуры (OD≈3), выход достигает 100 мкг; колонка обладает высокой способностью к связыванию.
- ※ Совместимость с множеством нижестоящих приложений : Очищенный продукт не содержит остатков белков, РНК и геномной ДНК; его можно непосредственно использовать для энзиматического расщепления, лигирования, трансформации, ПЦР, секвенирования, трансфекции и других процедур.
- ※ Операция быстрая и простая : Работа при комнатной температуре, общее время — около 16 минут; специальное оборудование не требуется; можно проводить как центрифугированием, так и под вакуумом.
- ※ Доступно два варианта исполнения : TD435-CQ-50 (50 циклов), TD435-CQ-100 (100 циклов), отвечают различным требованиям по пропускной способности;
- ※ Сопутствующие воронка и сборная труба Комплект включает воронку объёмом 25 мл и сборный колбочку объёмом 2 мл, что обеспечивает удобство работы под отрицательным давлением и возможность загрузки крупных объёмов образцов.
- ※ Строгий контроль качества Каждая партия проходит проверку на активность, чистоту и содержание эндотоксинов; к ней прилагается протокол контроля качества, что обеспечивает стабильность и надёжность результатов.
- ※ Годовая гарантия качества : С момента продажи предоставляется годовая гарантия; все реактивы прошли строгие испытания.
Состав продукта и технические параметры (все типоразмеры)
| Компонент / Параметр | 5 раз | 50 раз | 100 раз | 200 раз | Условия хранения |
|---|---|---|---|---|---|
| Раствор РНКазы A | 100 мкл | 600 мкл | 2×600 мкл | 4×600 мкл | 4°C |
| P1 (красный) | 10 ml | 60 ml | 2×60 мл | 4×60 мл | 4°C |
| P2 | 10 ml | 60 ml | 2×60 мл | 4×60 мл | Комнатная температура |
| P4 | 10 ml | 60 ml | 2×60 мл | 4×60 мл | Комнатная температура |
| Буфер для элюирования плазмидной ДНК Endo-Free | 5 ml | 30 ml | 2×30 мл | 3×30 мл | Комнатная температура (при первом использовании добавить этанол) |
| Элюат плазмидной ДНК | 1 ml | 5 ml | 10 ml | 2×10 мл | Комнатная температура |
| Колонка для очистки PN №3 | 5 штук | 50 штук | 2×50 штук | 4×50 штук | Комнатная температура |
| Воронка объёмом 25 мл | 10 штук | 50 штук | 100 штук | 200 штук | Комнатная температура |
| Коллекторная пробирка объёмом 2 мл | 5 штук | 50 штук | 2×50 штук | 200 штук | Комнатная температура |
| Характеристики продукта | • Выход плазмидной ДНК: около 100 мкг за одну реакцию (высококопийные плазмиды) • Чистота: Abs260/280 ≥ 1,8, Abs260/230 ≥ 2,0 • Эндотоксин: ≤0,5 ЕД/мкг • Размер плазмидной ДНК: до 20 кб • Объём элюата: ≥50 мкл (рекомендуется 100 мкл) • Рабочая температура: комнатная (15–30 °C) • Время работы: около 16 минут |
— | |||
Примечание: фактический выход зависит от числа копий плазмиды, оптической плотности бактериального раствора и других факторов; уровень эндотоксинов коррелирует с объёмом обрабатываемой бактериальной массы; рекомендуется соблюдать рекомендованную в инструкции нагрузку образца.
Компания «Цзяньши» — набор для быстрого извлечения плазмидной ДНК в среднем объёме
Цветовая индикация · Быстрое выделение за 16 минут · Эндотоксин ≤ 0,5 ЕД/мкг · Совместимость с экспериментами на уровне трансфекции
Ключевые особенности
- Трёхцветная система окрашивания : P1 красный → P2 → P4, состояние расщепления и нейтрализации сразу же очевидно
- Быстрое извлечение за 16 минут : Работа при комнатной температуре, без необходимости осаждения с использованием фенола/хлороформа/этанола
- Высокая чистота, низкое содержание эндотоксинов : Abs260/280 ≥ 1,8, эндотоксин ≤ 0,5 ЕД/мкг
- Выработка около 100 мкг Подходит для 5–15 мл бактериального раствора, высококопийные плазмиды
Спецификация продукта
- Артикул : TD435-CQ-5/50/100/200 (5/50/100/200 раз)
- Объём обработки : 5–15 мл ночного бактериального раствора (OD≈3)
- Размер плазмиды : до 20 кб
- Объём элюирования : ≥50 мкл (рекомендуется 100 мкл)
Сохранение и операции
- P1+РНКаза А Хранить при температуре 2–8 °C
- P2/P4/моющий раствор/элюирующий раствор : Хранить при комнатной температуре
- Рабочая температура : Комната (15–30 °C)
- Время операции : Около 16 минут
Комплект для быстрого извлечения плазмидной ДНК в среднем объёме — часто задаваемые вопросы
Набор предназначен для быстрого выделения плазмид из 5–15 мл бактериальной культуры; весь процесс занимает всего 16 минут, без необходимости осаждения с использованием фенола, хлороформа или этанола. Уникальная цветная реакция (P1 — красный, P2, P4) позволяет наглядно контролировать ход лизиса и нейтрализации. Содержание эндотоксинов в очищенном продукте не превышает 0,5 ЕД/мкг, что позволяет использовать его непосредственно в таких чувствительных экспериментах, как энзиматическое расщепление, трансформация, ПЦР, экстракорпоральная транскрипция, секвенирование, трансфекция и др.
• Подходит для среднего выделения высококопийных плазмид; однократный выход составляет около 100 мкг.
• Только для научных исследований (RUO).
После добавления P1 (красного) и повторного суспендирования клеток раствор приобретает равномерный малиново‑красный цвет; при добавлении P2, после аккуратного переворачивания, раствор становится прозрачным, с едва заметным бледно‑розовым оттенком — это свидетельствует о полном лизисе; после добавления P4, при дальнейшем переворачивании красный цвет полностью исчезает, переходит в жёлтый, и образуется обильный белый хлопьевидный осадок — что указывает на полную нейтрализацию.
• Если после нейтрализации по‑прежнему остаются красные или розовые участки, это свидетельствует о недостаточной нейтрализации; необходимо продолжать перемешивание до получения равномерного жёлтого цвета.
• Изменение цвета — наглядно и надёжно, не требует экспертной оценки, что значительно упрощает работу.
• Используется технология очистки на колонке с силикагелевой мембраной: плазмидная ДНК специфически связывается с очищающей колонкой, тогда как примеси — белки, РНК, геномная ДНК и др. — удаляются с помощью промывочного раствора; в завершение элюируется бездезоксирибонуклеазной/рибонуклеазной воды.
• Весь процесс осуществляется без использования каких‑либо органических растворителей, что исключает токсичность и пожароопасность фенола/хлороформа, а также устраняет необходимость в этапе осаждения этанолом, сокращая время работы и минимизируя потери образца.
Продукт очистки обладает чрезвычайно высокой степенью чистоты: Abs260/280 ≥ 1,8, Abs260/230 ≥ 2,0; содержание эндотоксинов ≤ 0,5 ЕД/мкг; отсутствуют следы белков, РНК и геномной ДНК; может непосредственно использоваться в таких экспериментах, как энзиматическое расщепление, трансформация, ПЦР, экстраклеточная транскрипция, секвенирование и трансфекция клеток.
• Для трансфекционных экспериментов рекомендуется использовать элюирование в воде, свободной от ДНКазы и РНКазы, а также убедиться в отсутствии загрязнения элюата эндотоксинами.
• При необходимости получения более низкого уровня эндотоксинов (например, при трансфекции первичных клеток) можно использовать процедуру удаления эндотоксинов или выбрать специализированный набор для деэнтеризации.
Рекомендуется обрабатывать бактериальную культуру объёмом 5–15 мл, выращенную в течение ночи (OD600 ≈ 3). Однократный выход составляет около 100 мкг (при наличии высококопийных плазмид). Фактический выход зависит от числа копий плазмиды, состояния роста штамма и других факторов.
• При слишком низком значении оптической плотности (OD) бактериального раствора (<2) можно несколько увеличить объём, однако общее количество бактерий не должно превышать предельной нагрузки колонки.
• При необходимости получения более высокого выхода можно параллельно использовать несколько колонок для очистки, объединяя элюаты, либо выбрать набор для экстракции большого объёма.
При низкой температуре окружающей среды в растворе P2 может выпадать осадок SDS. Можно поместить P2 в водяную баню при 37 °C на несколько минут, осторожно перемешивая, чтобы растворить осадок; после восстановления прозрачности препарат готов к использованию. Не допускайте сильного встряхивания, чтобы избежать образования избыточной пены, которая может снижать эффективность лизиса.
• Осадок не влияет на качество реагента; после растворения при нагревании его можно использовать в обычном режиме.
• После использования немедленно плотно закройте флакон, чтобы избежать испарения влаги и изменения концентрации.
① Взвесь бактерий должна быть полностью однородной, без видимых комков; ② После добавления P2 аккуратно перевернуть пробирку 8–10 раз, не подвергать вихревому перемешиванию; время лизиса — не более 5 минут; ③ Сразу после добавления P4 тщательно перевернуть до получения равномерного жёлтого цвета и образования обильного белого хлопьевидного осадка; ④ После центрифугирования отобрать верхний супернатант, избегая захватывания осадка; ⑤ Перед использованием моющего раствора необходимо добавить безводный этанол согласно инструкции и отметить галочкой; ⑥ Перед элюированием провести пустую центрифугацию в течение 1 минуты для удаления остаточного этанола.
• Если оптическая плотность культуральной жидкости превышает 3, можно пропорционально увеличить объём P1, P2 и P4.
• Предварительный нагрев элюента до 55–65 °C повышает эффективность элюирования.
Эффективность очистки у обоих методов одинакова. Центрифужный метод подходит для большинства лабораторий и не требует дополнительного оборудования; метод вакуумной фильтрации целесообразен при высокопроизводительной обработке (в сочетании с вакуумным мультиплексором), позволяет одновременно обрабатывать несколько образцов и обеспечивает более высокую скорость.
• При работе под вакуумом необходимо соединить колонку для очистки с 25‑мл воронкой, обеспечив надёжную герметичность; на каждом этапе следует создавать вакуум до полного прохождения жидкости.
• Степени центрифугирования: каждый раз при 10 000×g в течение 1 минуты; промывку повторяют дважды.
Подогрейте воду, свободную от ДНКазы и РНКазы, до 55–65 °C; после добавления к матрице колонки для очистки оставьте при комнатной температуре на 5 минут, затем проведите центрифугирование для элюирования. Предварительный подогрев повышает эффективность элюирования примерно на 20–30 %.
• При необходимости получения плазмиды высокой концентрации объём элюата можно уменьшить до 50 мкл (не рекомендуется снижать объём ниже 50 мкл, иначе коэффициент извлечения снизится).
• Рекомендуемый диапазон pH элюента — 7,0–8,5; при использовании чистой воды необходимо убедиться в отсутствии ДНКазы и РНКазы.
Взять, например, TD435‑CQ‑100 (100 циклов): раствор RNaseA — 2 × 600 мкл (при 4 °C), P1 (красный) — 2 × 60 мл (при 4 °C), P2 — 2 × 60 мл (при комнатной температуре), P4 — 2 × 60 мл (при комнатной температуре), моющий раствор для плазмидной ДНК Endo‑Free — 2 × 30 мл (при комнатной температуре; при первом использовании добавить этанол), элюент для плазмидной ДНК — 10 мл (при комнатной температуре), колонки для очистки PN № 3 — 2 × 50 шт. (при комнатной температуре), воронки объёмом 25 мл — 100 шт. (при комнатной температуре), сборные пробирки объёмом 2 мл — 2 × 50 шт. (при комнатной температуре).
• Перед первым использованием необходимо добавить весь RNase A в раствор P1, тщательно перемешать и хранить при 4 °C.
• К каждому флакону моющего раствора для плазмидной ДНК Endo‑Free объёмом 30 мл необходимо добавить 120 мл безводного этанола; после смешивания отметьте на флаконе галочкой, чтобы избежать повторного добавления.
• На все реагенты предоставляется гарантия качества сроком на один год с даты продажи.
Связанные продукты
Консультация по заказу: менеджер Ху
Консультация по заказу: менеджер Ан
Консультация по заказу конечного пользователя-заказчика из области научных исследований
Техническая консультация: технический специалист Бай
Служба поддержки клиентов
Douyin
Видео-аккаунт WeChat
Kuaishou
Контакты
Jianshi Biotechnology (Beijing) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
Адрес компании: г. Мапо, район Шуньи, г. Пекин, дом 12, дом 11, комната 401
Телефон: 86 18640171737
Электронная почта: gwang@jianshibio.com
Jianshi Biotechnology (Zhejiang) Ltd. Компания с ограниченной ответственностью.
адрес: город Юяо, провинция Чжэцзян
Телефон: 86 18640171737
Оставить сообщение
Если вас заинтересовали наши продукты, пожалуйста, оставьте свой номер телефона.
Проконсультироваться сейчас →Подписка на продукт
Подпишитесь на нас, чтобы быть в курсе обновлений продуктов и специальных предложений
Авторское право: Jianshi Biotechnology (Beijing) Co., Ltd. Powered by：CEglobal